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上海博迅茅台地区酱香型酒糟中高温真菌的分离鉴定

[导读]从茅台地区酱香型酒糟中分离筛选出4株耐高温真菌M1、M4、M5以及M6。对各菌株的降解特性研究表明:菌株M4有一定的淀粉和蛋白质分解能力;菌株M5纤维素分解能力较强, 55℃时其Hc值能达到3.21, 有一定的淀粉分解能力;菌株M1、M6有一定的淀粉、纤维素和蛋白质分解能力。

酒糟别名红糟、粕等, 是米、麦、高梁等酿酒后剩余的残渣。我国酒糟的综合利用能力较低, 主要应用于生产饲料、有机肥等[1]。贵州省作为酱香型白酒主产区之一, 每年产生近百万吨的白酒酒糟, 废弃酒糟量巨大且极易发生霉变, 若不及时处理就会造成资源浪费、环境污染。如何高效、经济、环保地综合利用酒糟逐渐成为人们所关注的焦点。目前, 白酒生产过程中酒糟资源化利用的问题成为我国白酒产业快速发展所面临的主要障碍[2]。高温菌是一类能在45℃以上生长和繁殖的嗜热微生物, 降解性能好、代谢效率高, 在很多领域都发挥着重要的作用[3]。若将菌株引入到酒糟中, 可生产动物饲料及生物有机肥。这既能很好地解决对环境的污染问题, 又带来了一定的经济效益, 由此可见, 发展酒糟的综合利用值得大力推广[4,5]。本实验从茅台地区酱香型白酒酒糟中筛选出耐高温真菌, 通过对其进行相关特性研究, 以期为后续高温菌剂的制备及生物有机肥的生产奠定基础, 这对于加强酒糟的资源化利用, 促进白酒产业的持续发展都将具有积极意义。1 材料与方法1.1 材料与试剂1.1.1 实验材料酒糟:取自茅台镇第七轮次抛糟的酱香型白酒酒糟。1.1.2 试剂无水乙醇 (分析纯) 、体积分数为95%乙醇:大津市富宇精细化工有限公司;可溶性淀粉 (分析纯) :天津市永大化学试剂有限公司;羧甲基纤维素钠 (分析纯) :天津市光复精细化工研究所;番红O (分析纯) :北京索莱宝科技有限公司;高蛋白脱脂高钙奶粉:内蒙古伊利实业集团股份有限公司;刚果红:天津市科密欧化学试剂有限公司;卢戈氏碘液:I 1 g, KI 2 g, 去离子水300 m L, 先用少量去离子水溶解KI, 再将I加入其中溶解完全, 最后补水至300 m L。1.1.3 培养基马铃薯葡萄糖琼脂 (potato dextrose agar, PDA) :马铃薯浸粉5.0 g/L, 葡萄糖20.0 g/L, 琼脂15.0 g/L, 氯霉素0.1 g/L, p H 5.8~6.2, 121℃灭菌20 min。纤维素培养基:羧甲基纤维素钠2 g, (NH4) 2SO41 g, KH2PO41 g, 酵母膏1 g, Na Cl 0.5 g, Mg SO4·7H2O 0.5 g, 琼脂20 g, Ca Cl20.25 g, 去离子水1 000 m L, p H自然, 115℃灭菌30 min。淀粉培养基:可溶性淀粉2 g, 蛋白胨10 g, 牛肉膏5 g, Na Cl 5 g, 琼脂20 g, 去离子水1 000 m L, p H自然, 120℃灭菌20 min。1.2 仪器与设备DMS-653生物数码显微镜:深圳市博宇仪器有限公司;SPX-250B智能型生化培养箱、DHG-9140B (101-2B) 智能型电热恒温鼓风干燥箱:上海琅歼实验设备有限公司;YXQ-LS-5DS11立式压力蒸汽灭菌器、SN-CJ-IF洁净工作台:上海博讯实业有限公司医疗设备厂;上海博讯实业有限公司医疗设备厂;Flex Cycler聚合酶链式反应 (polymerase chain reaction, PCR) 仪:德国Analytik Jena公司;BIO-RAD水平电泳系统:美国Bio-rad公司。

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