目的 探讨不同包装对灭菌口腔小器械在生物安全柜中的有效期的影响。方法 在生物安全柜中,对高压灭菌后玻璃器皿包装和纸塑包装的口腔小器械在不同时间点进行细菌采样培养实验,在第1天打开玻璃器皿包装的灭菌小器械后的4、8、24 h进行采样,以后每间隔24小时采集1次,连续10 d采样观察其细菌生长情况,同时在每一个时间点均采集一次纸塑包装的灭菌器械作为实验对照。结果 在生物安全柜相对无污染的情况下,对照组均无细菌生长,实验组在144 h的培养结果开始有菌落生长,168 h后的培养结果有统计学意义(P<0.05)。结论 在生物安全柜中相对无污染的条件下,玻璃器皿包装的口腔诊疗中的小器械的有效期远远超过《医疗机构口腔诊疗器械消毒技术操作规范》所规定的包装灭菌物品一经打开不得超过4 h的标准。

Objective To explore the validity period of oral sterilizing instruments in dif erent packages inside the bio-safety cabinet. Methods Inside the bio-safety cabinet, we brought the autoclaved dental gadgets packed in glassware and paper-plastic into microbial sampling cultivation experiment, and made observation of the bacteria growth at the 4th, 8th, 24 th hour at er sterilizing, with the sampling of once per 24 hours, lasting 10 days. Samples taken from the gadgets in paper-plastic each time when samples were taken from the gadgets in glassware were as the control. ResultsUnder the condition that the bio-safety cabinet was not contaminated, no colony grew in neither group in 144 hours; 168 hours later, the cultivation results indicated that colonies started to grow(P < 0.05). Conclusion Under the condition that the bio-safety cabinet is pollution-free, the validity period of gadgets in glassware packaging for dental clinic practices is far longer than the 4-hour limit at er the sterilized packages are opened, as is stipulated in the “Operating Specii cations for Sterilization Technology on Dental Instruments of Medical Institutions”.

随着我国社会经济的发展,口腔卫生知识的普及和人们自我保护意识的增强,口腔医疗机构的医院感染预防与控制已逐步成为当今人们关注的重要课题,人们更加重视口腔诊疗过程中器械的消毒灭菌状况和由此而产生的交叉感染现象 [1]。为了规范医疗机构口腔诊疗器械的消毒灭菌工作,保障医疗质量和医疗安全,原卫生部出台了《医疗机构口腔诊疗器械消毒技术操作规范》(以下简称《规范》)。《规范》适用于综合医院口腔科、口腔医院、口腔诊所等开展口腔诊疗科目服务的医疗机构。《规范》提出, 医疗机构应当根据口腔诊疗器械的危险程度及材质特点,选择适宜的包装容器灭菌方法,确保消毒灭菌质量 [2]。并且《规范》明确指出“灭菌物品容器一经打开使用不得超过4 h”[3]。目前常见的消毒灭菌方法较多、使用的灭菌器械包装材料各异,高压蒸汽灭菌是一种方便、快速、有效的灭菌方法 [4]。本课题预实验拟研究在生物安全柜中相对无污染的条件下, 对玻璃培养皿包装的灭菌小器械进行不同时间点的细菌采样培养实验,选用纸塑包装器械作为对照组 [5](纸塑包装的灭菌器械有效期一般为半年 [6]),观察其不同时间点的有效期。

1 材料与方法

1.1 实验条件和设备

HR40- ⅡA2型生物安全柜(青岛海尔特种电器有限公司),SW-CJ-1FD型净化工作台(苏州安泰空气技术有限公司),PYX-DHS型隔水式恒温培养箱 (上海百典仪器设备有限公司)等Ⅱ级生物实验室基本设施,XG1.D型高压蒸汽灭菌器(山东新华医疗器械股份有限公司)。

1.2 实验材料

纸塑包装卷料(重庆博迈生物技术有限公司)、玻璃培养器皿(江苏康健医疗用品有限公司)、血平板(郑州安图生物工程股份有限公司)、中和液(重庆庞通医疗器械有限公司)、营养琼脂(杭州天和微生物试剂有限公司)、芽胞生物指示试剂(美国3M公司)、可调加样枪10 ~ 1 000μL(上海赛默飞世尔仪器有限公司)等。

1.3 方法

1.3.1实验样品灭菌前准备将牙科车针、扩挫针等小型口腔器械经全自动超声清洗机清洗3 ~ 5 min[7]、检查、纯水冲洗、干燥、包装、灭菌。实验组用玻璃器皿包装20颗 / 包装,对照组用纸塑包装1颗车针 / 包装,每个包装放美国3M公司生产的灭菌测试卡进行灭菌效果监测。

1.3.2灭菌及效果监测将两种包装材料包装的小器械用高压蒸汽进行灭菌(温度为132℃,压力0.21 MPa),将嗜热脂肪杆菌生物测试包随实验物品放入高压蒸汽灭菌器内进行灭菌处理。灭菌结束后取出生物指示剂,用配套的生物监测培养箱进行细菌培养,监测灭菌效果阴性为合格。

1.3.3实验环境的选择两种不同包装的实验物品在灭菌后放入已灭菌的有盖不锈钢盘中,置于生物安全柜,待实验使用。生物安全柜每天实验前后清洁、紫外线消毒2 h;微生物实验室用湿式拖地后,采用三氧消毒机消毒,2 h/d[8],并记录消毒时间。

1.3.4采样时间玻璃器皿打开后的第1天分别于4、8、24 h采集样本,以后每间隔24小时采集1次, 连续10 d采集样本进行细菌培养实验。严格按照微生物室无菌操作技术进行实验过程 [9]。

1.3.5采样方法参照文献 [7] 的方法,开启消毒灭菌后的不锈钢盖,打开实验组玻璃器皿盖,用无菌镊子夹取一个小器械样本放入一支中和液管中,采集完后盖好玻璃器皿盖和不锈钢盖;同时撕开对照组纸塑袋包装口无菌操作将样本放入另一支中和液管中。作好标记和记录实验时间,连续10 d采集样本。

1.3.6细菌培养连续10 d实验中,每天将无菌操作采集的实验组、对照组样本在中和液中充分混匀后, 用标准移液枪准确取样1 m L加入到细菌培养皿中, 倒入45 ~ 50℃营养琼脂15 ~ 20 m L混匀,放入37℃培养箱进行细菌培养,每个样本取双份细菌培养 [10]。

1.3.7实验方法及菌落计数本实验组共采集3组, 每10天完成1组实验,每一监测时间点培养后的细菌菌落数累计相加。

1.4 统计学方法

采用SPSS 17.0软件进行数据处理,计量资料采用泊松分布的U检验,计数资料采用χ2检验,检验水准α=0.05。

2 结果

每批次培养皿培养结果中,空白培养皿均无细菌生长,染菌对照培养皿中均有数个细菌生长。玻璃器皿开封后采样培养结果,在生物安全柜相对无污染的情况下,对照组均无细菌生长,实验组在144 h的培养结果开始有菌落生长,168 h后的培养结果有统计学意义(P < 0.05)。见图1、表1。