正确充气延长二氧化碳传感器使用寿命

二氧化碳培养箱箱内气压由二氧化碳气体传感器控制。二氧化碳传感器正常反馈要求进气压为0.06 MPa。当箱内气压降低时, 二氧化碳传感器在低压刺激下有节奏地开闭, 向箱内慢慢充气, 当进气压达0.1 MPa时, 自动停止调节。如充气方法不当, 使进气压力增大, 当超过0.1 MPa甚至0.2 MPa压力, 会损伤二氧化碳传感器。开始这种损伤效应不明显, 不易察觉, 反复错误操作, 二氧化碳传感器损伤累积最终致命损坏, 使气压调节失灵。因此, 二氧化碳传感器寿命与二氧化碳进气压大小有关, 只要做好进气压调节, 就能保护二氧化碳传感器性能。二氧化碳传感器价格昂贵, 更换不易, 所以一定要做好进气压调节, 延长二氧化碳传感器使用寿命。

做培养时注意培养箱湿度

箱内湿度对于培养工作来说是一项非常重要然而又经常被忽略的因素。因为饱和湿度环境可以避免培养液中二氧化碳逃逸, 培养液中pH值稳定, 有利于细胞生长, 足够的湿度水平并且要有足够快的湿度恢复速度 (如在开关门后) 才能保证不会由于过度干燥而导致培养失败。所以二氧化碳培养箱使用过程中, 在箱内托盘中放一定量的灭菌水 (3/2至全盘) , 使箱内成为饱和湿度环境。如使用者忘记补加水, 使培养细胞处于低湿度甚至干热环境中, 培养液二氧化碳气体易挥发, 液体pH值升高, 影响细胞生长, 在工作中要力求避免此问题发生。样本多时, 箱内分区存放, 培养物用筐或瓷盘存放, 这样存取快速, 缩短开门时间, 减少箱内气体和湿度变化, 节省气体, 稳定了细胞生长环境。

防止二氧化碳培养箱污染做好箱内消毒

二氧化碳培养箱污染是导致细胞培养失败的一个主要因素, 所以要减少和防止污染的发生, 主要途径是尽量减少微生物可以生长的区域和表面, 采取消毒措施。例如, 针对箱内湿热环境易滋生细菌等问题, 我们采用在1000 mL水中加2 mL新洁尔灭液, 定期用酒精和紫外线消毒箱内空气, 培养物酒精擦拭入箱内, 盘里的水至少要一周换一次, 控制污染, 可以维持适应的蒸发作用, 减少箱内微生物滋生速度。为了培养箱免受污染并且保证仪器箱体内的生物清洁性, 有些二氧化碳培养箱设计了自动排除污染装置来有效防止污染的产生。目前有多种消毒灭菌方式, 如带有紫外消毒功能的CO2培养箱。还有的设计生产了HEPA过滤器能过滤培养箱内空气, 可过滤除去99.97%的0.3 μm以上的颗粒, 此外, 还有设计了能使箱内达到高温湿热的环境从而杀死污染微生物, 达到消毒灭菌目的的培养箱。

二氧化碳培养箱零点飘移的监控和零点的调整

培养箱使用过程中, 二氧化碳零点会发生自然飘移现象, 这种现象不能在箱面气体显示框中表现出来, 使用者也不易觉察到飘移结果。二氧化碳零点是否飘移, 可通过二氧化碳气体测试仪, 从控制盘上的采样口可以采到培养箱内的气体, 然后用气体色谱仪就可以测到二氧化碳浓度了。二氧化碳培养箱零点的调整的步骤 (一般以空气为标准来校零, 每半年进行一次, 以Thermo 3111型为例) :(1) 把二氧化碳浓度设定值设为零, 目的是不让钢瓶中二氧化碳进入箱内。(2) 打开所有的门5 min, 往水盆内加上水, 关上所有的门, 稳定12 h以上。(3) 等温湿度充分稳定后, 观察二氧化碳浓度显示值是否为零, 若不为零, 校正至零 (按Mode键至Cal档, 按左键或右键选择至显示“CO2 CAL XX .X”, 用上键或下键把数值调为零, 然后按Enter键确认) 。(4) 重新把二氧化碳浓度设定值设回 (如5.0%) 。